吴茱萸碱通过调控Notch通路抑制Skp2的表达对哮喘小鼠气道重塑和炎症反应的影响

目的 探究吴茱萸碱对哮喘小鼠的气道重塑和炎症反应的影响及其相关机制.方法 48只BALB/c小鼠按随机数字法分为正常对照组、模型组、吴茱萸碱组和吴茱萸碱处理的过表达Notch信号通路抑制剂KyoT2的腺病毒载体干预组,每组12只.采用卵清蛋白(OVA)诱导建立小鼠哮喘模型,吴茱萸碱组和吴茱萸碱加KyoT2腺病毒载体干预组以30 mg/kg的吴茱萸碱溶于生理盐水灌胃,其中,吴茱萸碱加KyoT2腺病毒载体干预组经鼻滴入5×108pfu的KyoT2腺病毒干预,其余组灌胃等量的生理盐水.末次激发24 h后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),进行细胞计数;ELISA法检测炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-4和OVA特异性IgE和IgG1;过碘酸雪夫(PAS)染色法检测气道杯状细胞增生;Masson染色法观察肺组织胶原沉积现象;免疫组化法检测α-SMA的表达;Western blot法检测α-SMA、Hes1、Skp2蛋白的表达.结果 与对照组相比,模型组小鼠BALF中总细胞和嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞数均显著升高(P<0.05),TNF-α、IL-1β、IL-4因子水平上升(P<0.05),α-SMA、Hes1和Skp2的表达上调(P<0.05).与模型组相比,吴茱萸碱组和吴茱萸碱加KyoT2腺病毒载体干预组BALF中总细胞和嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞数显著降低(P<0.05),TNF-α、IL-1β、IL-4因子水平下调(P<0.05),α-SMA、Hes1和Skp2的表达降低(P<0.05),气道炎症得到明显改善;与吴茱萸碱组相比,吴茱萸碱加KyoT2腺病毒载体干预组炎性因子显著降低,通路蛋白下调,气道炎症改善更为显著(P<0.05).结论 吴茱萸碱对哮喘小鼠气道重塑和炎症反应的改善,可能与Notch通路抑制Skp2的表达相关.