ATF6在转基因敲除鼠人工诱导蜕膜化模型中的研究

目的 利用小鼠人工诱导蜕膜化模型,探讨转录活化因子6(ATF6)在小鼠子宫内膜中的作用机制.方法 构建繁育野生型(Atf6+/+)和ATF6敲除型(Atf6-/-)小鼠,并构建小鼠人工诱导蜕膜化模型.雌鼠交配后见阴栓第1天记为Day 1.Day 4进行诱导蜕膜化,蜕膜化后48 h和72 h(即Day 6和Day 7)收集小鼠子宫进行相应指标检测,实时荧光定量PCR方法和蛋白质免疫印迹法检测Atf6 mRNA与蛋白质在蜕膜化子宫中的表达情况;免疫组织化学方法检测野生型(Atf6+/+)和ATF6敲除型(Atf6-/-)小鼠人工诱导蜕膜化模型中ATF6和催乳素(PRL)在子宫中的阳性信号表达情况.收集人子宫内膜生理周期中不同时相子宫内膜组织,进行石蜡包埋切片,免疫组织化学方法检测ATF6在子宫内膜中的阳性信号表达情况.结果 与小鼠未蜕膜子宫相比,Day 6和Day 7蜕膜化子宫中的Atf6 mRNA表达水平显著升高(P＜0.05),细胞核内的蛋白水平也显著增高(P＜0.05);Day 7时子宫大体形态学显示子宫较粗且均匀.野生型和敲除鼠诱导蜕膜化子宫HE染色显示,绝大部分子宫基质细胞变大变圆,表明诱导蜕膜化的子宫内膜蜕膜化充分;PRL免疫组化染色结果表明,在野生型(Atf6+/+)和敲除型(Atf6-/-)小鼠蜕膜化子宫内膜中,PRL染色阳性信号分布范围无显著性差异(P＞0.05).不同月经周期时相人子宫内膜组织的免疫组化结果提示,ATF6在月经期和增殖早期的表达水平较高,显著高于其余周期时相(P＜0.05).结论 ATF6能够参与子宫内膜蜕膜化,但不是蜕膜化发生的必要条件;ATF6可能通过参与子宫内膜的生理修复过程参与子宫内膜生理周期.