AUF1负向调控p21对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨AU结合因子1(AUF1)调控p21对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法 采用qRT-PCR和Western blot分别检测AUF1在骨肉瘤组织mRNA和蛋白表达水平.在骨肉瘤U2OS和HOS细胞中分别转染sh-NC和sh-AUF1后,CCK8检测细胞增殖情况;qRT-PCR检测增殖相关分子PCNA的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关分子Cleaved-caspase-3的表达水平.RNA结合蛋白免疫沉淀实验和RNA半衰期实验检测AUF1调控p21的机制.结果 AUF1 mRNA和蛋白的表达水平在骨肉瘤组织中明显高于癌旁正常组织(P<0.05),AUF1 mRNA的表达水平在骨肉瘤伴转移的患者中明显高于骨肉瘤不伴转移的患者(P<0.05).在U2OS和HOS细胞中分别转染sh-NC和sh-AUF1,AUF1 mRNA和蛋白的表达水平在转染sh-AUF1组较sh-NC组明显下降(P<0.05).低表达AUF1能够明显抑制U2OS和HOS细胞的增殖和增殖相关分子PCNA的表达(P<0.05),促进细胞凋亡和凋亡相关分子Cleaved-caspase-3的表达(P<0.05).低表达AUF1能够明显促进U2OS和HOS细胞中p21 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05).AUF1蛋白能够与p21 mRNA结合,同时低表达AUF1能够明显抑制p21 mRNA的降解速度(P<005).结论 AUF1在骨肉瘤组织和细胞中明显高表达,低表达AUF1能够抑制p21 mRNA降解,增加p21蛋白的表达,进而抑制骨肉瘤细胞增殖和促进细胞凋亡.