洗心汤对肠上皮屏障炎症模型P-gp/eCBs轴的影响

目的 观察洗心汤对肠上皮屏障(IEB)炎症及P-gp/eCBs轴的影响,基于"脑-肠轴"探讨其治疗阿尔茨海默病(AD)的可能机制.方法 将T84细胞接种于Transwell跨膜培养系统中模拟肠黏膜屏障,将细胞分为空白组、模型组和洗心汤24、48、72 h组,根据筛选后的造模及药物浓度进行干预,MTT法检测细胞存活率,上皮细胞电阻仪检测跨膜电阻(TEER),ELISA检测细胞上清液肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6、β淀粉样蛋白(Aβ)1-42、p-Tau含量,Western blot检测P-糖蛋白(P-gp)、大麻素受体1(CB1)、大麻素受体2(CB2)蛋白表达,免疫荧光染色检测P-gp表达,RT-PCR检测P-gp mRNA表达.结果 与空白组比较,模型组细胞存活率明显降低,TEER明显减小,细胞上清液TNF-α、IL-6、Aβ1-42和p-Tau含量明显增加,CB2蛋白表达明显降低,CB1蛋白表达明显升高,P-gp蛋白和mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,洗心汤48 h、72 h组细胞存活率明显升高,TEER明显增大,细胞上清液TNF-α、IL-6、Aβ1-42和p-Tau含量明显减少,CB2蛋白表达明显升高,CB1蛋白表达明显降低,P-gp蛋白和mRNA表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 洗心汤可能通过调节P-gp/eCBs轴相关蛋白表达改善脂多糖诱导的IEB炎症,影响AD病理进展.