海马小胶质细胞激活在神经病理性疼痛致认知功能障碍中的作用

目的 探究海马小胶质细胞激活在神经病理性疼痛致认知功能障碍中的作用.方法 采用选择性坐骨神经分支损伤法(SNI)建立小鼠神经病理性疼痛模型,依据随机原则将 36 只雄性C57BL/6 小鼠分为 3 组:假手术组(Sham组)、造模组(SNI组)、米诺环素组(SNI+mino组),每组 12 只.SNI+mino组术后连续 21 d口服米诺环素(40 mg/kg),Sham组和SNI组每天口服等剂量饮用水.术前 1 d及术后 7、14、21 d使用机械缩足阈值检测疼痛行为,术后 22 d使用旷场实验检测小鼠运动能力,Y迷宫实验和新物体识别实验检测认知功能.免疫荧光染色检测小鼠海马CA1 区小胶质细胞标记物Iba-1、吞噬活性标记物CD68 及突触标记物PSD95 等表达情况,高尔基染色观察海马CA1 区锥体神经元树突棘密度变化.结果 与同组术前 1 d相比,Sham组和SNI+mino组术后7、14 及21 d机械缩足阈值差异均无统计学意义(P>0.05),SNI组术后7、14 及21 d机械缩足阈值均降低(P<0.01);与同时间点Sham组相比,SNI组小鼠术后7、14 及21 d机械缩足阈值均下降(P<0.01),Y迷宫实验自发交替正确率降低(P<0.05),新物体识别实验辨别指数降低(P<0.05);与相应时间点SNI组相比,SNI+mino组小鼠术后 7、14 及 21 d机械缩足阈值均升高(P<0.01),Y迷宫自发交替正确率增加(P<0.05),新物体识别实验辨别指数增加(P<0.05).与Sham组相比,SNI组小鼠海马CA1 区Iba-1+细胞数量增加(P<0.05),Iba-1+细胞中CD68 的面积增加(P<0.05),小胶质细胞吞噬PSD95 的比例增加(P<0.05),锥体神经元树突棘密度降低(P<0.01);与SNI组相比,SNI+mino组小鼠海马CA1 区Iba-1+细胞数量降低(P<0.05),Iba-1+细胞中CD68 的面积减少(P<0.05),小胶质细胞吞噬PSD95 的比例降低(P<0.05),锥体神经元树突棘密度增加(P<0.01).结论 神经病理性疼痛可致小鼠海马CA1 区小胶质细胞激活,增加突触吞噬,最终导致认知功能障碍,而米诺环素可逆转这一过程.