几种动物肉源性成分膜芯片检测方法的建立

用斑点杂交技术构建对牛、羊、鸭肉源性成分快速检测的膜芯片方法.在3种动物的线粒体细胞色素b基因上设计特异性引物,对3种动物基因组进行PCR扩增,扩增产物用地高辛进行标记,作为标记探针.将3种动物PCR扩增产物固定到尼龙膜上,再选取3种常见动物作为参照,将其扩增产物一并固定到尼龙膜上.将制作好的膜芯片与标记探针进行斑点杂交试验,来检验标记探针的标记效率和特异性.试验结果表明,标记探针在1 pg/μL 浓度下显点清晰可见;3种标记探针分别与6种动物源性扩增产物杂交,结果标记探针只与其对应扩增源性产物发生显点.证明本研究设计的膜芯片标记探针具有灵敏度高,特异性强的特点,符合膜芯片检测要求,从而成功构建了一种快速检测牛、羊、鸭3种动物肉源性的膜芯片方法,同时也为动物源性成分检测提供新的依据.