猪伪狂犬病病毒gB、gC和gD蛋白的表达及诊断抗原筛选

为研发猪伪狂犬病的免疫学诊断试剂,利用杆状病毒表达系统表达了猪伪狂犬病病毒(PRV)gB、gC和gD蛋白,并对蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定;将纯化后的3种蛋白分别制备成不同蛋白类型的疫苗免疫健康仔猪,比较蛋白的免疫原性;将3种蛋白分别作为包被抗原建立间接ELISA方法,检测从不同地区收集的临床血清,与PRV中和试验检测结果进行了比较.结果显示,成功拯救出重组杆状病毒rPRV-gB-His株、rPRV-gC-His株和rPRV-gD-His株,经IFA鉴定,均可与猪伪狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应;表达出的蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定,可见大小分别约为120 ku、65 ku和50 ku的蛋白条带;3种蛋白免疫原性比较结果显示gD蛋白疫苗免疫组猪血清中和效价最高(1:22.4～1:32.0);3种蛋白建立的间接ELISA方法检测30份临床血清,结果gD蛋白作为包被抗原建立的ELISA方法与PRV中和试验的符合率最高(100.0％).表明gD蛋白是更好的诊断抗原,可用于PRV抗体检测试剂盒的开发.