同源物2增强子在喉癌细胞上皮-间充质转化中的作用

目的 同源物2增强子(EZH2)在喉癌组织上皮-间充质转化(EMT)中的作用尚不清楚.文中旨在探讨EZH2在喉癌细胞EMT中的作用. 方法 根据喉癌细胞系分为:TU177、SNU46、M4E、Tu686)和人类鼻咽上皮细胞(HNPECs)NP69.选取EZH2蛋白表达较高的TU177和Tu686细胞系转染EZH2si?RNA,其中转染效果高的为EZH2?1组,转染效果较低(沉默EZH2)的为EZH2?2组,对照为转染空载体的si?NC组.通过qRT?PCR和Western blot检测喉癌组织和细胞中EZH2、分泌的卷曲相关蛋白1(SFRP1)及组蛋白H3(H3K27me3)上赖氨酸27的三甲基化的表达.转染si?EZH2、si?SFRP1、oe?SFRP1或H3K27me3上调后,通过CCK?8检测细胞活力,免疫印迹法检测E?钙粘蛋白、N?钙粘蛋白、β?连环蛋白、c?Myc和CyclinD1的蛋白水平,免疫荧光法检测波形蛋白的表达.通过qPCR检测SFRP1启动子中H3K27me3的富集水平. 结果 与癌旁组织相比,癌组织中EZH2的mRNA及蛋白水平升高(P<0.05).细胞活力结果显示,si?EZH2?1组细胞活力较si?NC组有所下降(P<0.05).Western blot和免疫荧光法检测结果显示,si?EZH2?1组E?钙粘蛋白的表达明显增加,而N?钙粘蛋白的表达明显降低(P<0.05),波形蛋白的荧光强度减弱.与si?NC组相比,si?EZH2?1组的H3K27me3蛋白水平明显降低(P<0.05).ChIP?qPCR检测结果显示,si?EZH2?1组SFRP1启动子中H3K27me3的富集水平较si?NC组显著降低(P<0.05).qRT?PCR和West?ern blot检测结果显示,si?EZH2?1组中SFRP1的表达明显高于si?NC组(P<0.05). 结论 EZH2可以促进喉癌细胞的EMT发生,为喉癌临床管理提供了一种全新的策略.