钩藤碱对甲基苯丙胺依赖大鼠位置偏爱和血清外泌体miRNAs表达的影响

目的 观察钩藤碱对甲基苯丙胺依赖大鼠位置偏爱效应及其血清外泌体中miRNAs表达的影响.方法 通过甲基苯丙胺诱导大鼠条件性位置偏爱(CPP)模型.将30只大鼠随机分为正常组、模型组和实验组.模型组和实验组用2 mg·kg-1甲基苯丙胺皮下注射进行造模,正常组仅注射0.9％NaCl,同时实验组用60 mg·kg-1钩藤碱腹腔注射进行干预治疗.用蛋白质印迹法检测其生物标志物的表达情况,用基因芯片技术检测血清外泌体miRNAs表达谱.通过sRNA bench软件计算并校正miRNAs的表达量,用sugar-edge study软件分析各组间存在差异表达的miRNAs.结果 CPP测试显示,实验组、模型组和正常组在伴药箱的停留时间分别为(246.70±9.28)、(457.90±12.20)和(206.80±9.45)s,运动路程分别为(3536.90±110.54)、(4436.10±115.49)和(3410.40±94.54)cm;模型组在伴药箱的停留时间及运动路程与正常组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01).蛋白质印迹结果显示,外泌体特异性表达TSG101和CD63.基因芯片结果显示,甲基苯丙胺可上调276个血清外泌体miRNAs表达,其中50个差异均有统计学意义(均P<0.05),可下调25个miRNAs表达,其中2个差异均有统计学意义(均P<0.05);钩藤碱可下调228个miRNAs表达,其中32个差异均有统计学意义(均P<0.05),可上调51个miRNAs表达,其中9个差异均有统计学意义(均P<0.05).有189个miRNAs经甲基苯丙胺诱导后表达上调,但经钩藤碱治疗后出现下调.结论 差异表达的血清外泌体miRNAs可能是甲基苯丙胺成瘾的重要原因之一,钩藤碱可以明显减轻甲基苯丙胺引起的大鼠位置偏爱及血清外泌体miRNAs表达的改变.