RNA干扰TMEM33的表达对宫颈癌细胞生长的影响

目的 通过生物信息学方法探究跨膜蛋白33(transmembrane protein 33,TMEM33)在宫颈癌组织中的表达及其与预后的关系,观察TMEM33经RNA干扰后对宫颈癌细胞生长的影响.方法 应用基因表达谱数据动态分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库筛选出与宫颈癌相关的TMEM33基因,设计两条特异siRNA序列进行RNA干扰实验.实验分为3组:siTMEM33#1干扰组、siTMEM33#2干扰组、阴性对照组(非特异性siRNA).采用Western blot法检测siRNA干扰后宫颈癌SiHa/HeLa细胞中TMEM33蛋白的表达,CCK-8法检测SiHa/HeLa细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化,Western blot法检测细胞凋亡关键基因BCL-2、Bax及细胞周期蛋白CyclinD1、P21的表达变化.结果 与阴性对照组相比,特异性siRNA显著下调宫颈癌SiHa/HeLa细胞中TMEM33蛋白的表达(P<0.05);宫颈癌细胞增殖明显受抑,细胞凋亡显著增加,细胞周期S时相明显减少(P<0.05);细胞凋亡关键基因BCL-2表达下降而Bax表达上升,细胞周期蛋白CyclinD1水平降低而P21水平升高(均为P<0.05).结论 TMEM33经RNA干扰后,能明显抑制宫颈癌的细胞生长.TMEM33可能通过影响宫颈癌细胞周期、调节细胞凋亡及细胞周期相关蛋白的表达来促进宫颈癌细胞的生长.