miR-21靶向E2F1对三阴性乳腺癌细胞恶性生物学活性及裸鼠肿瘤抑制率的影响

目的 探究miR-21 靶向E2F1 对三阴性乳腺癌细胞恶性生物学活性及裸鼠肿瘤抑制率的影响.方法 将MDA-MB-231 细胞分为5 组,即MDA-MB-231 组、miR-21 inhibitor组、miR-NC inhibitor组、siRNA-E2F1 组和siRNA-NC组.检测细胞中miR-21 表达(RT-PCR法);分别检测细胞增殖(MTT法)、侵袭(Transwell法)、迁移(划痕实验)和凋亡能力(流式细胞仪);检测细胞中E2F1 蛋白表达;检测miR-21 与E2F1 的靶向关系(双荧光素酶实验报告).结果 MDA-MB-231 细胞中 miR-21 表达明显高于MCF10A细胞(P＜0.05);miR-21 inhibitor组细胞细胞中miR-21 表达明显低于MDA-MB-231 组(P＜0.05).与MDA-MB-231 组相比,miR-21 inhibitor组细胞吸光度值、侵袭能力、迁移能力和细胞中E2F1 蛋白表达均明显降低,细胞凋亡能力明显升高(P＜0.05);MDA-MB-231 组细胞吸光度值、侵袭、迁移、凋亡能力和细胞中E2F1 蛋白表达与miR-NC inhibitor组相比差异无统计学意义(P＞0.05).预测软件显示E2F1的3′UTR端与miR-21 有碱基互补结合点位.通过向MDA-MB-231 细胞中转染野生型E2F1(E2F1-WT)时,miR-21 组荧光素酶活性明显低于miR-NC组(P＜0.05);miR-21 组和miR-NC组突变体荧光素酶活性相比差异无统计学意义(P＞0.05).与siRNA-NC组相比,siRNA-E2F1 组细胞增殖、侵袭、迁移和细胞中E2F1 蛋白表达均明显降低,细胞凋亡能力明显增加(P＜0.05).与miR-NC inhibitor组裸鼠移植肿瘤第 8 天时相比,miR-21 inhibitor组裸鼠肿瘤体积明显降低,肿瘤抑制率为45.3％(P＜0.05).结论 低表达miR-21 可抑制三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭,促进凋亡,且抑制裸鼠移植瘤体积,其作用机制可能与抑制E2F1 表达有关.