人富血小板血浆来源外泌体促进体外培养施万细胞的增殖

目的 探究人富血小板血浆来源外泌体(PRP-exos)对体外培养的施万细胞(SC)增殖能力的影响.方法 采用聚合沉淀结合超速离心法提取PRP-exos,透射电镜观察其形态,纳米颗粒跟踪分析技术测定其浓度及粒径分布,Western blot检测外泌体表面标志蛋白CD63、CD81、CD9 及血小板膜糖蛋白CD41.分离培养大鼠SC,免疫荧光染色检测SC标记分子S100β的表达.荧光标记PRP-exos,与SC体外共培养,观察两者的相互作用.EdU实验检测PRP-exos对SC增殖能力的影响,CCK-8 法检测不同浓度(0、10、20、40、80、160 μg/ml)PRP-exos对SC增殖能力的影响.结果 提取的PRP-exos呈均匀的圆形囊泡,具有外泌体典型的茶托状形态,平均粒径(122.8±38.7)nm,浓度为 3.5×1012 个/ml,PRP-exos表面高表达CD63、CD81、CD9 及CD41(P＜0.001,P =0.025,P =0.004,P =0.032).分离培养的SC表达S100β,PRP-exos可被SC摄取.浓度为40、80、160 μg/ml的PRP-exos可促进SC的增殖,且40 μg/ml PRP-exos的促增殖效果最佳(P均＜0.01).结论 PRP中可提取较高浓度的PRP-exos,体外培养条件下,PRP-exos能够被SC摄取,且对SC具有促增殖作用.