TLR4/TRIF信号参与Ⅰ型小肠闭锁隔膜组织黏膜免疫应答的组织学研究

目的 观察Ⅰ型小肠闭锁肠腔隔膜组织黏膜β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TIR-domain-containing adapter-inducing interferon-β,TRIF)、肿瘤坏死因子受体相关因子蛋白 3(tumor receptor associ-ated factor,TRAF3)、干扰素-β(interferon-beta,IFN-β)和 干扰素-λ1(interferon-λ1,IFN-λ1)分子的表达特征,探索胚胎期Toll样受体4(toll like receptor4,TLR4)-TRIF非依赖性信号通路与肠管再通过程的相关性.方法 采用免疫组化技术观察和比较新生儿正常肠壁和Ⅰ型肠闭锁隔膜组织黏膜层内TRIF通路内重要分子的表达特征.收集16例患儿组织标本(解放军总医院儿科医学部1例,首都儿科研究所1例,河北医科大学第二医院6例,哈尔滨市儿童医院5例,长春市儿童医院3例),均为术中证实的Ⅰ型肠闭锁隔膜组织,为隔膜组;以同一患儿术中行肠切除、肠吻合过程中钳取收集的正常肠壁组织为对照组.患儿手术年龄为出生后1～3 d,其中空肠闭锁13例(男5例,女8例),回肠闭锁3例(男1例,女2例).将组织标本转入快速组织处理系统进行组织标本连续切片.采用常规HE染色进行定位,隔膜组和对照组各16例,每个病例染色后随机取4个视野(非肌肉区域),应用图像分析软件Image pro plus 6.0测量积分光密度(integral-optical density,IOD)和面积(Area),并计算出平均吸光度(A)(OD).OD=IOD/Area.采用t检验和双盲法分析免疫组化平均光密度.结果 新生儿正常肠壁组织黏膜层的TRIF、TRAF3、IFN-β和IFN-λ1的分子表达不明显或低表达,在隔膜组织黏膜层表达显著.半定量分析结果显示,TLR4、MyD88、TRAF6和IRAK4分子在隔膜组织黏膜层表达比新生儿正常肠壁黏膜层多,二者差异有统计学意义(隔膜组织分别为 0.6 316±0.0 268,0.5 066±0.0 378,0.6 091±0.0 270,0.3 841±0.0 610,正常肠壁分别为 0.4 333±0.0 409,0.3 758±0.0 365,0.4 108±0.0 263,0.2 108±0.0 573,P值分别为0.0 042,0.0 360,0.0 057,0.0 137.结论 TLR4/MyD88信号通路参与了 Ⅰ型肠闭锁隔膜组织的形成或发展.