葫芦素B调控circ-ITCH对鼻咽癌细胞生物学行为的影响及其机制

目的 探讨葫芦素(Cu)B对鼻咽癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其对circ-ITCH的调控作用.方法 采用不同剂量(10、30、60 nmol/L)CuB处理鼻咽癌细胞5-8F(CuB-L组、CuB-M组、CuB-H组),正常培养的5-8F细胞为Con组;pcDNA、pcDNA-circ-ITCH分别转染入5-8F细胞(pcDNA组、pcDNA-circ-ITCH组);si-NC、si-circ-ITCH分别转染入5-8F细胞后加入CuB处理细胞(CuB-H+si-NC组、CuB-H+si-circ-ITCH组);采用CCK-8实验、平板克隆形成实验、Transwell小室实验检测5-8F细胞活力、克隆形成能力、迁移及侵袭能力;采用实时荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测人永生化的正常鼻咽上皮细胞NP69、5-8F细胞及各组5-8F细胞中circ-ITCH的表达量;采用Western印迹检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达量.结果 与Con组比较,CuB-L组、CuB-M组、CuB-H组细胞活力、克隆形成数、迁移及侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9蛋白水平均明显降低,且不同剂量组比较差异有统计学意义(均P<0.05);与NP69细胞比较,5-8F细胞中circ-ITCH表达水平明显降低(P<0.05),而CuB不同剂量组中circ-ITCH表达水平明显升高(P<0.05);pcDNA-circ-ITCH组细胞活力、克隆形成数、迁移及侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9蛋白水平均比pcDNA组明显降低(P<0.05);CuB-H+si-circ-ITCH组细胞活力、克隆形成数、迁移及侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9蛋白水平均明显高于CuB-H+si-NC组(P<0.05).结论 CuB可通过上调circ-ITCH的表达从而减弱鼻咽癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力.