SIRT1/NF-κB信号通路在亚低温促进氧糖剥夺/复糖复氧小胶质细胞极化中的作用

目的:评价沉默调节蛋白1/核因子κB(SIRT1/NF-κB)信号通路在亚低温促进氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)小胶质细胞极化中的作用。方法:采用随机数字表法将生长良好的BV2小胶质细胞分为4组( n＝36)：对照组(C组)、OGD/R组(O组)、亚低温组(M组)和亚低温+SIRT1特异性抑制剂EX527组(ME组)。C组正常培养；O组氧糖剥夺3 h后，于37 ℃复氧复糖21 h；M组氧糖剥夺3 h后，于33 ℃复糖复氧21 h；ME组细胞于OGD/R前与EX527(终浓度为5 nmol/L)共培养12 h，其余处理同M组。采用CCK-8法测定细胞存活率；ELISA法检测上清液TNF-α、IL-6和IL-10浓度；qRT-PCR法检测CD206、CD32、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)的mRNA表达，免疫荧光染色法检测CD206和CD32表达，Western blot法检测iNOS、Arg-1、SIRT1、NF-κB p65(p65)和乙酰化NF-κB p65(Ac-p65)的表达。 结果:与C组比较，O组细胞存活率降低，上清液TNF-α、IL-6和IL-10浓度升高，iNOS、Arg-1、CD32和CD206表达上调，SIRT1表达下调，Ac-p65/p65比值升高( P<0.05)；与O组比较，M组细胞存活率升高，上清液TNF-α和IL-6浓度降低，IL-10浓度升高，CD206、Arg-1和SIRT1表达上调，CD32和iNOS表达下调，Ac-p65/p65比值降低( P<0.05)；与M组比较，ME组细胞存活率降低，上清液TNF-α和IL-6浓度升高，IL-10浓度降低，CD206、Arg-1和SIRT1表达下调，CD32和iNOS表达上调，Ac-p65/p65比值升高( P<0.05)。 结论:SIRT1/NF-κB信号通路参与了亚低温促进OGD/R小胶质细胞极化的过程。