苦参碱对牛源无乳链球菌的体外抑菌活性分析

旨在探讨苦参碱对牛源无乳链球菌的体外抑菌活性及其对无乳链球菌毒力因子的影响,为中药单体抑菌产品的开发与应用提供理论依据.通过测定最小抑菌浓度和抑菌曲线分析苦参碱对无乳链球菌的抑菌活性;同时利用全血杀伤试验、黏附试验、生物膜染色和透射电镜观察等方法,探究苦参碱对无乳链球菌抵御机体杀伤、对宿主的黏附和生物膜形成的影响.结果显示,苦参碱在体外能够有效地抑制无乳链球菌(ATCC13813)的增殖,其对无乳链球菌的最小抑菌浓度为4 mg·mL-1,苦参碱可显著降低无乳链球菌生物膜的形成;透射电镜可见无乳链球菌的细胞膜表面皱缩,胞壁光滑变薄,生物膜的形成受到明显抑制.苦参碱可显著抑制无乳链球菌对于乳腺上皮细胞的黏附.荧光定量PCR结果表明,苦参碱可显著降低与侵袭和免疫逃避相关毒力基因ScpB、CpsA、CylE和CAMP的表达(P＜0.05),显著上调CpsE基因的表达(P＜0.05).此外,苦参碱可显著降低与毒力因子黏附作用相关的Bac、Bca、Lmb、BIBA、PI-2b和FbsBB基因的表达(P＜0.05).以上结果表明,苦参碱在体外能够有效抑制无乳链球菌(ATCC13813)的增殖,破坏细胞的完整性,降低菌株的侵袭力,从而达到抗菌的效果.