白藜芦醇上调miR-204-3p减轻H/R诱导的肾小管上皮细胞损伤的研究

目的 探讨白藜芦醇对低氧复氧(H/R)诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK2细胞)损伤的影响及可能机制.方法 体外培养HK2细胞,分为对照组、白藜芦醇组、H/R组和不同剂量(5、10、20、50、100μmol/L)白藜芦醇+H/R组.转染anti-miR-NC、anti-miR-204-3p的细胞给予含10 μmol/L白藜芦醇和H/R条件的共同培养,并分别记为10 μmol/L白藜芦醇+H/R+anti-miR-NC组和10 μmol/L白藜芦醇+H/R+anti-miR-204-3p组.CCK-8法检测HK2细胞活力,流式细胞术检测HK2细胞凋亡和活性氧(ROS)水平,Western blot法检测HK2细胞内Bax和Bcl-2蛋白表达,细胞免疫荧光双染检测HK2细胞内含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3和细胞色素(cyto C)蛋白表达,试剂盒法检测HK2细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平及HK2细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测HK2细胞中miR-204-3p表达 水平.结果 与对照组比较,H/R组细胞活性、Bcl-2、SOD、GSH、miR-204-3p表达水平明显降低,细胞凋亡率、caspase-3、cyto C、Bax、ROS、MDA、LDH水平明显升高(P＜0.05).与 H/R 组比较,H/R+10 μmol/L 白藜芦醇组细胞活性、Bcl-2、SOD、GSH、miR-204-3p 表达水平明显升高,细胞凋亡率、caspase-3、cyto C、Bax、ROS、MDA、LDH水平明显降低(P＜0.05).与10 μmol/L白藜芦醇+H/R+anti-miR-NC 组比较,10 μmol/L 白藜芦醇+H/R+anti-miR-204-3p 组细胞活性、Bcl-2、SOD、GSH、miR-204-3p表达水平明显降低,细胞凋亡率、caspase-3、cyto C、Bax、ROS、MDA、LDH水平明显升高(P＜0.05).结论 白藜芦醇通过上调miR-204-3p表达来缓解H/R诱导的HK2细胞损伤.