华蟾素介导miR-497-5p/VEGFA通路调控肺癌细胞的增殖、凋亡及血管生成
Journal of Modern Oncology(2023)
Abstract
目的:探讨华蟾素介导miR-497-5p/VEGFA通路对肺癌细胞增殖、凋亡及血管生成的影响.方法:选取肺癌细胞株A549、H460为研究对象,以不同浓度华蟾素(0、25、50、75、100、125、150 μg/mL)作用细胞株,采用MTT检测细胞活力.随后,设置组别为空白组、华蟾素组(100 μg/mL华蟾素)、华蟾素+inhibitor NC组、华蟾素+miR-497-5p inhibitor组,通过MTT 检测细胞活力;克隆形成实验检测克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞中VEGF、VEGFA蛋白表达;RT-qPCR检测细胞中miR-497-5p表达;并采用荧光素酶报告实验确定miR-497-5p靶向VEGFA.结果:随着华蟾素浓度的升高,A549、H460细胞增殖活力明显下降(P<0.01);与空白组相比,华蟾素组A549、H460细胞克隆形成能力明显降低、细胞凋亡明显增加、VEGF和VEGFA蛋白表达明显降低、miR-497-5p mRNA表达明显升高(P<0.01);荧光素酶报告实验显示miR-497-5p靶向VEGFA;与华蟾素+inhibitor NC组相比,华蟾素+miR-497-5p inhibitor组A549、H460细胞中miR-497-5p mRNA表达明显降低、VEGF和VEGFA蛋白表达明显升高、细胞克隆形成能力明显增加、细胞凋亡明显被抑制、细胞增殖活力明显增加(P<0.05).结论:华蟾素可能通过调控miR-497-5p/VEGFA通路从而抑制肺癌细胞增殖和血管生成,并诱导细胞凋亡.
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