SIRT5通过促进IDH2去琥珀酰化增加COPD小鼠肺上皮细胞的抗氧化能力

目的 探讨去乙酰化酶5(SIRT5)对慢性阻塞性肺病(COPD)中肺上皮细胞抗氧化能力的调节作用及机制.方法 体外实验:肺上皮细胞MLE-12经H2 O2、SIRT5过表达质粒(SIRT5-OE)或空载体(EV)处理后分为control组、H2 O2组、SIRT5-OE组、EV组、H2 O2+SIRT5-OE组、H2 O2+EV组.在体实验:用烟草烟雾(CS)和脂多糖(LPS)诱导小鼠COPD模型,并分为正常组(小鼠不进行任何处理)、CS组(模型小鼠)、CS+saline组(生理盐水静脉注射到模型小鼠中)、CS+rhSIRT5组(将rhSIRT5静脉注射到模型小鼠中)、CS+rhSIRT5+SIRT5 inhibitor 1组(将rhSIRT5和SIRT5抑制剂共同注射到模型小鼠中).按照说明书检测各组肺细胞/肺组织中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平.免疫沉淀法和蛋白免疫印迹法检测柠檬酸脱氢酶2(IDH2)的琥珀酰化水平和SIRT5蛋白表达.结果 与EV组相比,SIRT5-OE组抑制IDH2的琥珀酰化水平降低,SIRT5蛋白表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).与control组相比,H2 O2组中IDH2的琥珀酰化、凋亡率、MDA、ROS的水平都增加/高(P<0.05).与H2 O2+EV组相比,H2 O2+SIRT5-OE组的琥珀酰化和细胞凋亡率降低,且SOD和GSH-Px水平增加,差异均有统计学意义(P<0.05).与正常组相比,CS组肺组织中IDH2的琥珀酰化、MDA、ROS的水平均增加/高(P<0.05).与CS+saline组相比,CS+rhSIRT5组中IDH2的琥珀酰化减少,而SOD和GSH-Px水平均增加,差异均有统计学意义(P<0.05).与CS+rhSIRT5组相比,CS+rhSIRT5+SIRT5 inhibitor 1组中MDA、ROS的水平均增加,SOD、GSH-Px水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 SIRT5通过促进IDH2去琥珀酰化增加COPD小鼠肺上皮细胞的抗氧化能力.