基于突触可塑性的抑郁小鼠证候生物学基础研究

目的 通过观察母婴分离联合束缚应激诱导抑郁小鼠脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)-原肌球蛋白受体激酶B(tropomyosin receptor kinase,TrkB)-环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)通路与突触可塑性的变化,以及温阳、解郁和温阳解郁合方的调节作用,探讨抑郁小鼠证候生物学基础.方法 小鼠出生后5～14 d给予母婴分离8 h/d,离乳后分为母婴分离(MS)组、模型(MS+RS)组、温阳(Wenyang)组、解郁(Xiaoyao)组、温阳解郁(XSF)组及阳性药(Fluoxetine)组,并以正常小鼠为对照(NC)组.NC、MS、MS+RS组小鼠以正常饲料喂养,Wenyang、Xiaoyao、XSF及Fluoxetine组小鼠分别给予二仙汤、逍遥散、温阳解郁方及盐酸氟西汀药混饲料,90日龄后除NC组连续给予21天3 h/d的束缚应激.采用糖水及旷场实验评估抑郁样行为,高效液相-电化学检测海马组织单胺类神经递质含量,免疫组化法观察突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein,PSD95)蛋白表达.实时荧光定量PCR法及Protein Simple分别检测海马组织BDNF、TrkB、CREB、PSD95及突触素(synapsin,SYN)的mRNA和蛋白表达水平.结果 与NC组比较,MS+RS组小鼠糖水偏好指数显著下降(P<0.05),运动路程及中央区穿越次数显著减少(P<0.05);海马区5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)含量显著降低(P<0.01);BDNF、TrkB、CREB、PSD95与SYN mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05);海马CA1、CA3区PSD95表达显著减少(P<0.05).与MS+RS组比较,3个中药干预组上述指标均有不同程度的改善,其中XSF组小鼠糖水偏好指数与Xiaoyao组5-HT含量均有极显著升高(P<0.01);各中药干预对海马BDNF、TrkB、CREB、PSD95及SYN mRNA表达均有显著调节作用,仅温阳与温阳解郁方对海马BDNF、CREB蛋白表达有极显著上调作用(P<0.01);中药各方及氟西汀对海马CA1区、温阳解郁方对CA3区PSD95表达的调节作用显著(P<0.01).结论 温阳与温阳解郁方对抑郁小鼠神经可塑性的影响显著,其可能通过BDNF-TrkB-CREB信号通路调节海马区突触可塑性,改善小鼠抑郁样行为,推测其证候生物学基础与阳虚有关.