小檗碱通过调控ELK-3抑制人肝癌细胞的上皮-间质转化

[目的]研究小檗碱与ELK-3和人肝癌细胞的上皮-间质转化的关系及其作用机制.[方法]将HuH7细胞分为空转组、pcDNA3.1-ELK-3组、小檗碱组和小檗碱+pcDNA3.1-ELK-3组.荧光倒置显微镜观察慢病毒转染后的细胞荧光状态;蛋白免疫印迹法(Western Blot)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ELK-3和ELK-3靶基因重组人早期生长反应蛋白-1(EGR-1)蛋白和基因表达量,上皮-间质转化相关分子钙黏附素E和波形蛋白的基因和蛋白表达量,以及乙型转化生长因子-1(TGF-β1)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中TGFβ1、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)、p38、磷酸化p38(p-p38)蛋白表达量;细胞划痕实验和体外Transwell小室实验观察HuH7细胞迁移和侵袭能力.[结果]与空转组比较,小檗碱组的ELK-3、EGR-1和波形蛋白的基因和蛋白表达量显著降低(P<0.05),钙黏附素E基因和蛋白表达量显著增加(P<0.05),TGF-β1蛋白和p-ERK1/2/ERK1/2和p-p38/p38蛋白比值显著降低(P<0.05),细胞迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05),而pcD-NA3.1-ELK-3组的结果与之相反.与pcDNA3.1-ELK-3组比较,小檗碱+pcDNA3.1-ELK-3组的ELK-3、EGR-1和波形蛋白的基因和蛋白表达量显著降低(P<0.05),钙黏附素E蛋白和基因表达量显著增加(P<0.05),TGF-β1蛋白和p-ERK1/2/ERK1/2和p-p38/p38蛋白比值显著降低(P<0.05),并且细胞迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05).[结论]小檗碱可通过减少ELK-3的表达量,从而抑制人肝癌细胞的上皮-间质转化.