β-雌二醇对宫颈癌Hela细胞增殖的影响

目的 探讨不同浓度β-雌二醇(E2)对宫颈癌Hela细胞增殖的影响及机制.方法 体外培养Hela细胞,根据E2的浓度将其分为对照组、低浓度组、高浓度组.利用CCK8法和细胞克隆形成试验检测E2对Hela细胞增殖的影响;流式细胞仪检测E2对细胞凋亡和周期的影响;Transwell法检测E2对细胞迁移能力的影响;在对照组和高浓度组中,利用实时定量PCR(qRT-PCR)检测HPV18 E6、E7、p21、p53、CDK2、Rb基因的表达,Western blotting检测p21、p53、CDK2、Rb、Rb磷酸化(pRb)蛋白的表达.结果 相比于对照组及低浓度组,高浓度组中细胞增长率降低(P<0.001),细胞克隆形成数量被抑制(P=0.013),细胞周期G0/G1期延长(P<0.001).高浓度E2可降低HPV18 E6/E7 mRNA表达水平(P=0.049,P=0.043),并下调CDK2、Rb mRNA和蛋白表达水平(PCDK2mRNA=0.035,PRb mRNA=0.003,PCDK2蛋白=0.009,PRb蛋白=0.008),上调p21、p53 mRNA和蛋白表达水平(Pp21 mRNA=0.042,Pp53 mRNA=0.035,Pp21蛋白=0.039,Pp53蛋白=0.043),同时下调pRb蛋白表达水平(P<0.001).结论 高浓度E2能够抑制Hela细胞增殖,其机制可能与抑制HPV18 E6/E7癌基因、促进p53和p21蛋白的表达、调节细胞周期蛋白(CDK2、Rb)的水平进而影响正常细胞周期进程有关.