5-Aza-dC对恶性黑色素瘤细胞的抑制作用及机制研究

目的:研究5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-dC）对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖、凋亡及体外迁移、侵袭等恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法:2022年1月至6月，通过CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验及流式细胞术检测5-Aza-dC对小鼠恶性黑色素瘤B16细胞体外增殖、迁移、侵袭及凋亡等恶性生物学行为的影响；蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及缝隙连接蛋白Cx43的表达水平。采用Mann-Whitney U检验、Welch检验和单因素方差分析。 结果:CCK-8实验结果显示：与空白对照组及DMSO对照组相比，5-Aza-dC给药组细胞存活率均明显降低（均 P<0.01）；同一药物浓度作用下不同给药时间细胞存活率对比显示，细胞存活率随着作用时间的增加而降低（ P<0.01）。细胞划痕实验结果显示：5-Aza-dC给药组细胞划痕愈合率均明显低于空白对照组［（74.67±11.91）%比（100.00±0.00）%， P<0.01］。Transwell侵袭实验结果显示：空白对照组侵袭细胞数量明显多于5-Aza-dC给药组［（444±65）个比（2±1）个］，差异有统计学意义（ P<0.01）。流式细胞术（Annexin V/PI双染法）结果显示：5-Aza-dC给药组细胞凋亡率高于空白对照组［（11.35±0.66）%比（2.51±0.04）%］，差异有统计学意义（ P<0.01）。Western blot结果显示：与空白对照组比较，5-Aza-dC给药组Bcl-2表达下调，Bax表达上调，Cx43蛋白表达增强。 结论:5-Aza-dC可以促进小鼠恶性黑色素瘤B16细胞凋亡，抑制其增殖活力及迁移、侵袭能力，从而发挥抗肿瘤作用，其抑制作用可能与上调Cx43蛋白表达相关。