CART基因启动子双荧光素酶重组载体构建

可卡因—苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine regulated transcript peptides,CART)是一种内源性神经肽,广泛分布于中枢神经和外周神经系统.CART具有多种不同的生理功能,在牛繁殖机能研究中发现,CART还可以通过影响雌激素分泌抑制卵泡发育.这一发现为深入分析牛卵泡闭锁以及提高母畜繁殖率提供理论依据.然而CART基因转录调控机制尚不明确.研究利用pGL3系列萤火虫荧光素酶表达载体,Mlu I、Xho I双酶切割牛CART基因启动子-475 bp～+22 bp区域,成功构建重组质粒,转染293 T细胞,检测相对荧光活性,为后续筛选CART基因核心启动子活性片段创造条件,进而为CART转录调控分子机制的探究奠定基础.