连翘酯苷A对玉米赤霉烯酮诱导的PK-15细胞凋亡的影响

为探究连翘酯苷A(FA)对玉米赤霉烯酮(ZEA)诱导的猪肾上皮细胞PK-15 凋亡的影响及其可能的保护机制,体外培养PK-15 细胞,经 36.55 μg·mL-1 ZEA和不同质量浓度(31.25、62.50、125.00 μg·mL-1)FA 处理 24 h,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率;通过Hoechst 33342 活细胞染色在荧光显微镜下观察细胞凋亡情况;利用试剂盒检测细胞上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)活性和活性氧(ROS)水平;利用实时荧光定量PCR测定细胞中的Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA的表达水平.结果表明:质量浓度在 125.00 μg·mL-1以下的FA可以提高PK-15 细胞存活率;FA能显著提高经ZEA处理的PK-15 细胞存活率,且能显著降低经ZEA处理的细胞上清液中的LDH活性,抑制ZEA引起的ROS的生成;ZEA能显著提升Bax、Caspase-8、Caspase-3和Caspase-9 mRNA的表达量,Bcl-2 mRNA的表达量显著降低;不同质量浓度的FA能不同程度地提高Bcl-2 mRNA的表达量,降低Bax、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA的表达量.上述结果说明ZEA会诱导PK-15 细胞发生凋亡,但FA可通过抑制内源性凋亡途径和氧化应激反应抑制细胞凋亡,从而起到保护作用.