穿心莲内酯对体外大鼠髓核细胞生物行为的影响

[目的]探讨穿心莲内酯(andrographolide,Andro)对体外大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)生物行为的影响及其机制.[方法]利用叔丁基过氧化氢(tert-buttyl hydroerioxide,TBHP)处理NPCs构建凋亡模型,不同浓度的Andro分别处理正常NPCs和TBHP诱导的NPCs,采用CCK8检测毒性以筛选Andro的最佳作用浓度和时间.将细胞分为空白对照(blank control,BC)组、TBHP(T)组、TBHP+Andro(TA)组、TBHP+Andro+PI3K inhibitor(LY294002)(TA-Pih)组和TBHP+PI3K inhibitor(T-Pih)组,并给予相应体外处理.流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA检测炎性细胞因子水平,Western blot检测凋亡标志物蛋白的表达水平.[结果]Andro的最佳作用浓度和时间为18μmol/L和24 h.与BC组相比,T组细胞凋亡率、TNF-a、IL-1β、IL-6水平、Bax蛋白水平显著升高(P＜0.05),Bcl-2和p-Akt蛋白水平显著降低(P＜0.05);与T组相比,TA组细胞凋亡率、TNF-a、IL-1β、IL-6水平、Bax蛋白水平显著降低(P＜0.05),Bcl-2和p-Akt蛋白水平显著升高(P＜0.05),T-Pih组的趋势则相反;与T-Pih组相比,TA-Pih组细胞凋亡率、TNF-a、IL-1β、IL-6水平、Bax蛋白水平显著降低(P＜0.05),Bcl-2和p-Akt蛋白水平显著升高(P＜0.05).[结论]Andro能抑制细胞凋亡,降低炎性细胞因子的水平,其机制可能与Andro调控PI3K/Akt通路有关.