miR-433通过JAK2/STAT3信号通路调控氧化应激干预术后认知功能障碍的实验研究

目的:探讨miR-433对术后认知功能障碍(POCD)大鼠海马氧化应激和认知功能的影响及其作用机制.方法:将大鼠随机分为Control组、POCD组、POCD+NC mimic组、POCD+miR-433 mimic组.构建大鼠POCD模型,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-433在POCD大鼠海马组织中的表达;Morris水迷宫试验评价大鼠认知功能;苏木精-伊红(HE)染色检测海马组织病理学变化;原位末端凋亡(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测氧化应激水平;双荧光素酶报告基因系统检测miR-433和酪氨酸激酶2(JAK2)的靶向关系;免疫印迹法(Western Blot)检测海马组织Cleaved Caspase-3、Bad、Bcl-2、JAK2、p-JAK2、转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3蛋白表达.结果:与Control组比较,POCD组大鼠海马组织miRNA-433表达降低,逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,POCD组神经细胞紊乱,细胞数量减少,神经元细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3和Bad蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达、超氧化物歧化酶(SOD)水平降低,丙二醛(MDA)水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).与POCD+NC mimic组比较,POCD+miR-433 mimic组大鼠海马组织中miRNA-433表达升高,逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,海马内细胞排列较规则,坏死神经细胞数量减少,神经元细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3和Bad蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达和SOD水平升高,MDA水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验结果显示:JAK2是miRNA-433的靶基因,与POCD+miR-433 mimic+Vector组比较,POCD+miR-433 mimic+pcDNA-JAK2组大鼠海马组织p-JAK2、p-STAT3、Cleaved Caspase-3、Bad蛋白及MDA水平升高,Bcl-2蛋白和SOD水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:miR-433通过JAK2/STAT3信号通路抑制氧化应激,从而预防大鼠发生术后认知功能障碍.