基于SNAIL信号通路及肠道菌群研究密点麻蜥抑制胃癌肝转移的作用机制

目的 基于SNAIL信号通路及肠道菌群研究密点麻蜥Eremias multiocellata对胃癌肝转移的抑制作用及机制.方法 36只BALB/c裸鼠随机分为对照组和造模组,造模组脾脏注射HGC-27胃癌细胞,造模4周剖腹探查验证造模成功.随后将造模组随机分为模型组、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU,0.025g/kg)组和密点麻蜥(2.6g/kg)组,每组8只.对照组和模型组ig生理盐水,密点麻蜥组ig密点麻蜥水煎剂,5-FU组ip5-FU,连续干预4周后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组裸鼠肝组织病理变化;采用Western blotting检测各组裸鼠肝组织SNAIL及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达;取末次给药2 h后各组裸鼠新鲜粪便进行16S rRNA高通量测序检测肠道菌群的变化.结果 与对照组比较,模型组裸鼠肝组织出现肝小叶破坏、肝组织坏死,中性粒细胞浸润,癌细胞核大深染;肝组织SNAIL、N-cadherin蛋白表达水平显著升高(P＜0.001),E-caherin蛋白水平显著降低(P＜0.001).与模型组比较,密点麻蜥组肝细胞排列趋于整齐,结构完整,癌组织灶变小;肝组织中SNAIL、N-cadherin蛋白表达水平显著降低(P＜0.001),E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P＜0.001).16SrRNA结果显示,与对照组比较,模型组裸鼠肠道菌群失调紊乱,厚壁菌门/拟杆菌门(Firmicutes/Bacteroidetes,F/B)值下降,经密点麻蜥干预后F/B值升高.门水平上,密点麻蜥主要对厚壁菌门进行调节,厚壁菌门在对照组中丰度占比40.9％,与对照组比较,模型组中厚壁菌门的丰度降低到26.4％.经密点麻蜥干预后厚壁菌门丰度提高到30.2％.属水平上,密点麻蜥主要对胃癌肝转移裸鼠肠道菌群中差异菌属(拟杆菌属Bacteroides、梭状芽孢杆菌属Clostridia_UCG-014、副拟杆菌属Parabacteroides、幽门螺旋杆菌Helicobacter)发挥调节作用.结论 密点麻蜥可能通过降低SNAIL蛋白表达,增加E-cadherin蛋白表达,降低N-cadherin蛋白表达,来抑制EMT发展进程,发挥对胃癌肝转移的抑制作用.此外,密点麻蜥通过调节厚壁菌门丰度,增加作用于癌细胞表面G蛋白偶联受体的短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)含量,调节机体自身免疫相关菌属(拟杆菌属、梭状芽孢杆菌属、副拟杆菌属),降低致病菌幽门螺旋杆菌的丰度,发挥对胃癌肝转移的抑制作用.