甘草酸替代胆固醇构建载雷公藤甲素的脂质纳米粒的适宜性研究

目的 鉴于胆固醇潜在的健康危害,探索利用甘草酸替代胆固醇,制备用以替代胆固醇脂质纳米粒(cholesterol lipid nanoparticles,CLN)的甘草酸脂质纳米粒(glycyrrhizic acid lipid nanoparticles,GLN),通过包载抗肿瘤药物雷公藤甲素(triptolide,Tr)制备载雷公藤甲素的甘草酸脂质纳米粒(GLN loaded with triptolide,Tr@GLN),探讨甘草酸替代胆固醇制备抗肿瘤纳米载体的适宜性.方法 采用乙醇注入法分别制备Tr@GLN和载雷公藤甲素的胆固醇脂质纳米粒(CLN loaded with triptolide,Tr@CLN),分别测定两者粒径、多分散指数(polydispersity index,PDI)、ζ电位、药物包封率和载药量;透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)拍摄其形态;共聚焦显微镜拍摄人肝癌HepG2细胞对两者摄取情况;建立皮下荷瘤肝癌小鼠模型,对比研究Tr@GLN与Tr@CLN的体内抗肿瘤效果.结果 与Tr@CLN相比,Tr@GLN在粒径、PDI、ζ电位、包封率和载药量等理化性质均无显著性差异.Tr@GLN和Tr@CLN的平均粒径分别为(115.59±1.23)、(97.28±0.95)nm;ζ 电位分别为(-19.63±3.14)、(-7.77±0.12)mV;Tr 包封率分别为(89.70±0.39)％、(87.39±0.37)％;Tr载药量分别为(2.25±0.01)％、(2.31±0.01)％;甘草酸包封率为(87.46±0.65)％;甘草酸载药量为(13.41±0.09)％.TEM观察到,相比Tr@CLN,Tr@GLN呈更加均匀圆整的球状.GLN增加了 HepG2细胞对药物的摄取.给药12 d后,Tr@GLN对荷瘤小鼠肿瘤体积抑制率达到78.9％,显著高于Tr@CLN组抑制率(42.4％)和Tr组抑制率(18.3％)(P＜0.05),Tr@GLN治疗后肿瘤中重组Ki-67蛋白(recombinant Ki-67 protein,Ki-67)表达减少,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达减少,并将肿瘤相关的巨噬细胞从肿瘤M2表型重新诱导为M1表型.结论 制备的Tr@GLN与Tr@CLN具有相似理化性质,但GLN包载更有利于增加肿瘤细胞的摄取,Tr@GLN表现出更强的抗肿瘤作用,其抗肿瘤作用可能与抑制肿瘤细胞分化、减少肿瘤新血管生成、促进肿瘤相关巨噬细胞的极化调节相关,说明所构建的GLN适宜于作为纳米载体,为抗肿瘤药物的高效传递提供新思路.