一种操作简便的小鼠原代白色成熟脂肪细胞培养方法

目的 建立一种适合短期培养、操作简便、成本低廉的白色成熟脂肪原代细胞培养的方法.方法 本研究通过分离小鼠附睾处和肾周白色成熟脂肪细胞后,分别采用短期成熟脂肪细胞培养方法和天花板培养方法,培养原代白色成熟脂肪细胞.油红O染色鉴定并观察成熟脂肪细胞细胞形态,CCK8法测定细胞活性,并通过Western blot检测PPARγ蛋白相对表达量,qPCR检测CD36、FAS、CPT1A、FABP4 mRNA表达量.结果 油红O染色显示改良培养方法细胞形态良好、均一,而天花板法细胞形态出现变化.CCK8显示新鲜分离的白色成熟脂肪细胞与此培养方式细胞活性差异无统计学意义(P=0.959,P=0.657,P=0.694).Western blot显示新鲜分离的白色成熟脂肪细胞与培养72 h细胞的PPARγ蛋白表达量差异无统计学意义(P=0.759),在使用GW9662处理后显著下降(P<0.001).qPCR显示,经过GW9662处理后CD36、CPT1A mRNA表达量上调(P<0.001,P=0.003),FAS、FABP4 mRNA表达量下调(P=0.001,P<0.001).结论 本研究建立了一种培养时间短、操作简单的原代白色成熟脂肪细胞的培养方法,为成熟脂肪细胞的相关研究提供技术保障.