Siglec-15对胃癌细胞系MKN-45增殖和凋亡作用的影响

目的 探讨Siglec-15对胃癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 免疫组织化学检测胃癌组织中Siglec-15的表达;收集胃癌细胞系检测细胞中Siglec-15的表达,慢病毒感染法构建Siglec-15低表达稳转细胞系(LV-sh-S15)和阴性对照组(LV-NC),RT-qPCR和Western blotting实验验证慢病毒转染效率;CCK-8法检测MKN-45细胞系LV-NC组和LV-sh-S15组细胞增殖差异,细胞克隆形成检测Siglec-15对细胞克隆形成能力的影响;流式细胞术检测两组细胞周期及凋亡变化;Western blotting检测凋亡相关蛋白及信号通路蛋白变化.结果 免疫组织化学检测发现,相比胃息肉和胃癌早期标本,Siglec-15在胃癌中期标本中表达升高;检测胃癌细胞系中Siglec-15的表达发现,MKN-45细胞中Siglec-15的表达处于中等水平,慢病毒感染法成功构建Siglec-15低表达稳转细胞系;CCK-8和细胞克隆形成实验发现,相比LV-NC组细胞,LV-sh-S15组细胞增殖能力和细胞克隆率降低.流式细胞术和Western blotting发现,相比LV-NC组细胞,LV-sh-S15组细胞凋亡率升高,并且PI3K和AKT的磷酸化水平降低.结论 在胃癌早期标本中Siglec-15的表达升高,敲低Siglec-15表达影响MKN-45细胞的增殖和凋亡水平,表明Siglec-15可以作为一种肿瘤标志分子,调控肿瘤进展.