miR-433通过JAK2/STAT3信号通路调控氧化应激在大鼠术后认知障碍中的作用研究

目的 探讨miR-433对术后认知障碍(POCD)大鼠海马氧化应激和认知功能的影响及其作用机制.方法 将大鼠随机分为4组,Control组、POCD组、POCD+NC mimic组、POCD+miR-433 mimic组.构建大鼠POCD模型,实时荧光定量PCR实验(RT-qPCR)检测miR-433在POCD大鼠海马组织中的表达;Morris水迷宫试验评价大鼠认知功能;苏木精-伊红(HE)染色检测海马组织病理学变化;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氧化应激水平;双荧光素酶报告基因系统检测miR-433和JAK2的靶向关系;Western blotting 检测海马组织中 cleaved caspase-3、Bad、Bcl-2、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3 蛋白的表达.结果 与Control组比较,POCD组大鼠海马组织中miRNA-433表达显著降低,逃避潜伏期延长,穿越目标平台次数减少,POCD组神经细胞紊乱,细胞数量明显减少,神经元细胞凋亡率显著升高,cleaved caspase-3和Bad蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)水平显著降低,丙二醛(MDA)水平显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与POCD+NC mimic组比较,POCD+miR-433 mimic组大鼠海马组织中miRNA-433表达显著升高,逃避潜伏期缩短,穿越目标平台次数增加,海马内细胞排列较规则,坏死神经细胞数量明显减少,神经元细胞凋亡率显著降低,cleaved caspase-3和Bad蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,SOD水平显著升高,MDA水平显著降低.双荧光素酶报告基因实验结果JAK2是miRNA-433 的靶基因,与 POCD+miR-433 mimic+Vector 组比较,POCD+miR-433 mimic+pcDNA-JAK2 组大鼠海马组织中JAK2、p-JAK2、p-STAT3、cleaved caspase-3、Bad蛋白以及MDA水平显著升高,而Bcl-2蛋白、SOD水平显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-433通过JAK2/STAT3信号通路抑制氧化应激从而预防大鼠术后认知障碍.