PEDV nsp15基因真核表达载体的构建及蛋白的表达
wf（2023）
摘要
猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)含有一种名为Nsp15 的非结构蛋白,为了研究Nsp15 蛋白在侵染宿主细胞时产生的作用,成功构建了PEDV Nsp15 基因的真核表达载体.通过PCR技术扩增Nsp15 基因片段,经双酶切连接到pCMV-Myc载体上,酶切鉴定及测序结果证实PEDV Nsp15 基因成功克隆到pCMV-Myc载体中,并将重组质粒命名为pCMV-Myc-Nsp15.将重组质粒pCMV-Myc-Nsp15 转染至IPEC-J2 细胞中,利用Western Blot和间接免疫荧光技术检测pCMV-Myc-Nsp15 的表达以及定位情况.结果 显示,pCMV-Myc-Nsp15 在IPEC-J2 细胞中成功表达,并且在胞质胞核均匀分布.为进一步研究PEDV Nsp15 蛋白的功能奠定基础.
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