梅迪-维斯纳病毒实时荧光RPA检测方法的建立

Liu Ran,Zhang Lin,Chen Sixu, Shi Xiaona,Liu Shuying

wf（2023）

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Abstract

为实现对梅迪-维斯纳病毒(MVV)的快速检测,根据MVV gag基因保守序列设计特异性引物和探针,通过优化反应条件和反应体系,建立了 MVV的实时荧光RPA检测方法,并通过灵敏度、特异性、重复性试验及样品复核检测进行评价.结果显示:该方法最佳反应温度为39℃,用时短,20 min即可完成检测;灵敏度高,检测下限可达10-1 pg/μL,比常规PCR检测结果灵敏约10 倍;特异性强,与小反刍兽疫病毒、羊败血性链球菌、牛肠道病毒、传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、肺炎支原体等继发呼吸系统症状病原无交叉反应;重复性好,对于相同质量浓度的模板DNA检测变异系数均小于10％;可有效检测出MVV,与PCR结果一致.综上所述,本研究建立的MVV 荧光RPA检测方法适用于MVV的临床快速检测,可为该病的诊断及防控提供依据.

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