HPLC测定大鼠肠道菌群中辛伐他汀及其代谢物的方法学研究

目的:建立HPLC测定大鼠肠道菌群中辛伐他汀及辛伐他汀酸浓度的方法.方法:取含辛伐他汀或辛伐他汀酸的大鼠肠道菌群孵育液加入含有内标物(异替格瑞洛,浓度为:1×103 ng·mL-1)的蛋白沉淀剂沉淀,离心后取上清液进行HPLC分析.色谱条件:Amethyst C18-H色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇(A)-0.1％磷酸溶液(B)(80:20).检测波长237 nm,流速0.8 mL·min-1,柱温30℃,进样量50μL.结果:采用甲醇溶液作为蛋白沉淀剂,含药菌液与甲醇溶液比例为1:2时,在4℃下离心力为15250 g离心,对辛伐他汀及辛伐他汀酸提取率最高.结论:该方法专属性强、提取率高、精密度好、操作简便,可应用于辛伐他汀相关的药动学研究.