PRP通过NRF2/HO-1通路对LPS诱导的BV2小胶质细胞神经炎症的保护作用

目的 探究富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的BV2细胞炎症反应保护作用与机制.方法 BV2小胶质细胞分成正常对照组、10％PRP对照组、LPS组(LPS诱导)、3％PRP+LPS 组(LPS 诱导,3％PRP 预处理)、5％PRP+LPS 组(LPS 诱导,5％PRP 预处理)和 10％PRP+LPS 组(LPS 诱导,10％PRP预处理),CCK-8测定BV2细胞增殖.共聚焦显微镜测定BV2细胞线粒体膜电位水平,荧光法检测ROS生成情况,Griess 法测定 NO 水平.Western blot 检测 IL-6、TNF-α、BACH1、GPX4、NRF2 和 HO-1 蛋白表达.此外,用 HO-1 抑制剂处理BV2小胶质细胞后实验分为正常对照组,LPS组,ZnPP+LPS组,10％PRP+LPS组,ZnPP+LPS+10％PRP,Western blot检测HO-1、IL-6和TNF-α蛋白表达.结果 与正常对照组相比,PRP促进BV2细胞增殖(P＜0.01);LPS组线粒体膜电位下降,ROS生成增多,NO、IL-6、TNF-α、BACH1水平升高(P＜0.01),而GPX4、NRF2、HO-1表达水平下降(P＜0.01).与LPS组相比,3％PRP+LPS组、5％PRP+LPS组、10％PRP+LPS组BV2细胞增殖活性升高,线粒体膜电位升高;ROS、NO、IL-6、TNF-α、BACH1 水平降低(P＜0.01);GPX4、NRF2、HO-1 在不同浓度 PRP(3％、5％、10％)组表达升高(P＜0.01).另外,使用HO-1抑制剂结果显示,与LPS组比较,ZnPP+LPS组IL-6和TNF-α表达增高;与10％PRP+LPS+ZnPP组比较,HO-1抑制剂能够逆转PRP对LPS诱导下BV2细胞IL-6和TNF-α表达的影响(P＜0.01).结论 PRP可以通过激活NRF2/HO-1信号通路来抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应.