黑木耳糖蛋白的提取及单糖、氨基酸组成分析

为获得优质的黑木耳糖蛋白,明确其单糖及氨基酸组成,本研究通过单因素实验和响应面法对超声波辅助碱法提取黑木耳糖蛋白的工艺条件进行优化,并采用AKTAgo纯化仪、DEAE GE Healthcare色谱柱对糖蛋白进行分离纯化,采用高效液相色谱(HPLC)法分析其单糖和氨基酸组成.黑木耳糖蛋白的最佳提取工艺条件为:超声时间90 min、料液比1:90 g/L、超声功率200 W、pH8.4、提取温度45℃,此条件下糖蛋白提取的综合评分为55.93分.经分离纯化得到糖蛋白的纯度为74.1％、蛋白回收率为37.5％,该糖蛋白中的单糖组成以葡萄糖(9.95 mg/g)、甘露糖(5.24 mg/g)为主,氨基酸以L-天冬氨酸/L-天冬酰胺(1.16 mg/g)、L-苯丙氨酸(1.14 mg/g)、L-谷氨酸/L-谷氨酰胺(1.10 mg/g)为主.因此,超声波碱法可有效提高黑木耳糖蛋白提取效率,且黑木耳糖蛋白中含有酸性杂多糖、必需氨基酸齐全,为黑木耳糖蛋白的深入研究及应用开发提供了科学参考.