超声血流增强效应联合程序性细胞死亡蛋白配体1单抗改善实体肿瘤免疫微环境

目的:探讨低强度超声激励微泡空化(USMC)产生的血流增强效应联合PD-L1单抗对实体肿瘤免疫微环境的改善作用。方法:将MC38结肠癌荷瘤小鼠随机分为四组：对照组(26只，无任何治疗)、USMC组(27只，USMC治疗)、程序性细胞死亡蛋白配体1抗体(anti-PD-L1)组(27只，anti-PD-L1治疗)和USMC+anti-PD-L1组(27只，USMC联合anti-PD-L1治疗)。USMC治疗使用VINNO70超声诊疗一体机。采用超声造影评价肿瘤血流增强效应；通过绘制肿瘤生长曲线及记录小鼠生存期，评价抗肿瘤疗效；流式细胞术分析肿瘤内CD8 +T细胞数量及功能、CD4 +T细胞分化情况、骨髓来源的抑制性细胞(MDSC)比例及肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的极化表型分布；酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测肿瘤内趋化因子CXCL9、CXCL10及HIF-1α含量；免疫荧光分析肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达。 结果:USMC治疗后超声造影分析肿瘤峰值强度(PI)、曲线下面积(AUC)较治疗前增加(均 P<0.05)。USMC联合anti-PD-L1治疗明显抑制了肿瘤进展。USMC+anti-PD-L1组治疗后肿瘤微环境中CD8 +T细胞量及其Ki67的表达、γ干扰素(IFN-γ)与颗粒酶B(Grzm-B)的分泌量高于其他3组，辅助性T细胞(Th1)比例增加，调节性T细胞(Tregs)、MDSC比例减少，TAM表型向M1型极化(均 P<0.05)。ELISA分析显示，联合治疗还提高了肿瘤中CXCL9、CXCL10的浓度，降低了HIF-1α的含量(均 P<0.05)；肿瘤组织VEGF的荧光表达量也显著低于对照组( P<0.05)。 结论:超声血流增强效应联合PD-L1单抗能改善实体肿瘤免疫微环境，USMC产生的血流增强效应可作为一种增效PD-L1抗体肿瘤免疫治疗的超声新方法。