黄灯笼辣椒CcCASP1基因的克隆与VIGS载体构建
wf（2022）
摘要
为研究海南黄灯笼辣椒凯氏带膜蛋白在抗病过程中的功能,利用PCR技术从辣椒叶片cDNA中扩增出CASP基因,对其蛋白序列进行生物信息学分析,并构建病毒诱导基因沉默(VIGS)载体,验证其效果.结果表明:成功克隆CASP基因,并命名为CcCASP1基因.该基因全长为501 bp,编码166个氨基酸.经生物信息学分析表明,CcCASP1蛋白是一个小分子碱性疏水稳定的膜蛋白,存在4个相对保守的跨膜螺旋结构域.系统进化关系分析结果表明,CcCASP1蛋白与番茄和烟草CASP蛋白亲缘关系较近.利用酶切连接的方法构建了 VIGS载体,在海南黄灯笼辣椒中成功地沉默了 CcCASP1基因,且效果显著,为深入研究CcCASP1基因在黄灯笼辣椒中的抗病功能提供技术支持.
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