木薯bHLH79基因的克隆及抗病表型分析

bHLH(basic Helix-Loop-Helix)转录因子家族在植物生长发育、抗逆等过程中具有重要功能,但其在木薯抗病中的作用却尚未报道.本研究采用RT-qPCR技术从木薯'华南8号'叶片中克隆到一个预测的bHLH基因,命名为MebHLH79(Phytozome数据库编号:Manes.06G098500).序列分析显示,MebHLH79基因开放阅读框架长843 bp,编码280个氨基酸.系统进化分析表明,木薯MebHLH79与多种植物的bHLH蛋白均具有较高的同源性,其中与橡胶bHLH79蛋白同源性高达99％,表明该基因在进化上相对保守.亚细胞定位结构显示MebHLH79定位于细胞核.RT-qPCR技术分析结果表明该基因的表达受细菌性枯萎病原菜豆黄单胞菌木薯萎蔫致病变种(Xanthomonas phaseoli pv.manihotis,Xpm)诱导后显著上调.利用病毒诱导基因沉默技术沉默MebHLH79基因,表达检测结果表明MebHLH79表达明显下调;Xpm侵染后抗病性检测结果显示,沉默植株叶片病斑面积显著大于对照植株,推测MebHLH79正调控木薯对细菌性枯萎病的抗性.本研究为进一步探索MebHLH79调控木薯抗细菌性枯萎病的分子机制提供参考.