化瘀祛痰方调节AMPK/SIRT1/PGC-1 α信号通路抑制炎症小体活化改善AS小鼠肝脏脂质沉积的机制研究

目的 探讨化瘀祛痰方调节腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1/过氧化酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(AMPK/SIRT1/PGC-1 α)信号通路调控炎症小体活化对动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠肝脏脂质沉积的影响及作用机制.方法 将24只ApoE-/-小鼠按随机数字表法分为模型组、辛伐他汀组、化瘀祛痰方组,8只C57BL/6J小鼠作为正常组对照.造模结束次日各组开始灌胃,正常组和模型组采用等容积生理盐水,辛伐他汀组采用辛伐他汀混悬液2.275 mg/(kg·d),化瘀祛痰方组采用化瘀祛痰方,生药量为20 g/(kg·d),每日1次,连续给药8周.采用全自动生化分析仪检测血清血脂水平;HE染色和油红O染色观察肝脏组织病理和脂质沉积情况;Western Blot法检测肝脏腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1 α(PGC-1α)、线粒体转录因子A(Tfam)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白表达;实时荧光定量PCR法检测肝脏线粒体DNA(mtDNA)水平;ELISA法检测血清IL-1 β、IL-18水平.结果 与正常组比较,模型组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白总胆固醇(LDL-C)水平显著升高(P＜0.01);肝脏细胞肿胀,排列紊乱,出现大量脂肪空泡,脂质沉积明显;p-AMPK、SIRT1、PGC-1 α、Tfam蛋白表达降低,NLRP3蛋白表达升高(P＜0.05);mtDNA相对表达量减少(P＜0.01);IL-1 β、IL-18水平升高(P＜0.01).与模型组比较,辛伐他汀组和化瘀祛痰方组TG、TC、LDL-C水平降低(P＜0.01);肝细胞结构有所恢复,少见脂肪空泡,脂质沉积现象改善明显;两组p-AMPK、SIRT1、PGC-1α、Tfam蛋白表达升高,NLRP3蛋白表达减少(P＜0.05,P＜0.01);mtDNA相对表达量增加(P＜0.01);两组血清IL-1 β、IL-18水平降低(P＜0.01).4组血清高密度脂蛋白总胆固醇(HDL-C)水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 化瘀祛痰方可通过AMPK/SIRT1/PGC-1 α信号通路调节线粒体功能,抑制炎症小体激活和炎性反应,改善肝脏脂质沉积.