基于网络药理学分析连翘治疗牛乳房炎的作用机制及体内验证

基于网络药理学和体内动物试验探究连翘(Forsythiae fructus,FF)治疗牛乳房炎的作用机制.利用TCMSP数据库检索连翘的成分和作用靶点,并与通过DisGeNET、GeneCards和OMIM数据库检索出的乳房炎的疾病靶点交集整合,获得连翘治疗乳房炎的潜在靶点.运用Cytoscape 3.6.1构建成分-靶点-疾病生物网络图,同时结合STRING平台构建PPI网络,通过DAVID平台及Cytoscape插件GlueGO进行GO和KEGG富集分析.构建金黄色葡萄球菌诱导的小鼠乳房炎模型,进行组织病理学、荧光定量PCR(qRT-PCR)及酶联免疫吸附(ELISA)分析.结果显示,连翘23个潜在成分对应208个靶点,牛乳房炎167个靶点,药物-疾病交集靶点25个.PPI核心靶点有白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等,主要参与免疫反应、细胞因子活性等过程,涉及IL-17信号通路、NF-κB信号通路、TNF信号通路等.体内试验结果表明,连翘能改善金黄色葡萄球菌诱导的小鼠乳房炎的炎症损伤.qRT-PCR及ELISA试验结果显示,连翘用药组IL-17/NF-κB信号通路关键基因表达量及蛋白含量均显著低于模型组(P＜0.05或P＜0.01),揭示连翘抗乳房炎作用与IL-17/NF-κB信号通路有关.从网络药理学角度初步揭示了连翘治疗乳房炎的多成分-多靶点-多通路的特点,为探究连翘治疗乳房炎作用机制提供了理论依据.