枳术丸汤剂中枳实不同剂量配伍对慢传输型便秘小鼠肠道菌群多样性的影响

目的 基于攻补兼施法探讨在大剂量生白术的配伍下不同枳实剂量配伍的作用及枳术丸(ZZW)对慢传输型便秘(STC)小鼠肠道菌群的影响.方法 将65只SPF级别昆明(KM)小鼠随机分为空白对照组10只与模型组50只,空白对照组正常喂养,模型组使用番泻叶0.8g/kg灌胃7d,制成脾虚模型后禁食禁水,隔天喂食生大米,饮水0.5h,连续8d建立脾虚便秘模型.15d后将模型组随机分为5组,每组10只,即模型组、西药组、ZZW低剂量组、ZZW中剂量组、ZZW高剂量组.ZZW低、中、高剂量分别为9.7 g/kg、11.6 g/kg、13.7 g/kg,西药组给予莫沙必利2.5 mg/kg.空白对照组和模型组灌胃同等量蒸馏水.治疗1周后收集肠道内容物,行16SrRNA测序,取结肠组织HE染色行病理形态学观察.结果 ZZW高剂量组能够显著提高肠道推进率(P＜0.05).结肠切片肉眼观察发现小鼠结肠组织黏膜光滑,未见充血、糜烂及器质性损伤.HE病理学检查结果显示,模型组存在轻微水肿,腺体不齐现象,其余各组小鼠结肠黏膜无变薄、固有层炎症浸润,结肠腺体形态正常.16SrRNA测序结果显示,STC小鼠肠道菌群物种丰富度和均匀度显著下降(P＜0.05),菌群多样性升高(P＜0.01).门水平上,与空白对照组比较,模型组拟杆菌门相对丰度升高、厚壁菌门相对丰度降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).与模型组比较,ZZW低剂量组较模型组拟杆菌门相对丰度显著降低(P＜0.01),厚壁菌门、变形菌门相对丰度升高(P＜0.05),ZZW高剂量组较模型组拟杆菌门相对丰度降低(P＜0.05),厚壁菌门相对丰度升高(P＜0.05).属水平上,模型组较空白对照组Prevotellamassilia、葡萄球菌属、拟杆菌属、丁酸弧菌属相对丰度升高(P＜0.05),螺杆菌属、另枝菌属相对丰度显著降低(P＜0.01),经治疗后ZZW低剂量组Prevotellamassilia、葡萄球菌属、拟杆菌属相对丰度降低(P＜0.05),ZZW中剂量组丁酸弧菌属相对丰度降低(P＜0.05);ZZW高剂量组Prevotellamassilia、葡萄球菌属相对丰度显著降低(P＜0.01).此外,与模型组比较,ZZW低剂量组狄氏副拟杆菌属相对丰度降低(P＜0.05).结论 攻补兼施代表方ZZW能明显缓解STC小鼠便秘症状,以ZZW高剂量组效果最佳,但治疗效果与枳实剂量不存在量效关系,其治疗机制可能与ZZW水煎液调整菌群丰度、多样性及菌群物种数目,恢复正常肠道生态环境有关.