黄芪甲苷Ⅳ通过激活Nrf-2/HO-1信号通路抑制氧化应激介导的人SY5Y细胞凋亡

目的 探讨黄芪甲苷Ⅳ(AST4)对H202诱导的人SY5Y细胞氧化应激损伤以及细胞凋亡的保护作用及机制.方法 体外培养SY5Y细胞,用H202诱导建立氧化应激模型,分为PBS组、H202模型组和AST Ⅳ组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞活力,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡.取各组细胞的上清液,比色法测定丙二醛(MAD)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的含量.免疫荧光细胞化学染色法检测裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)和核因子E2相关因子(Nrf-2)的表达和分布.Western blot法检测细胞凋亡蛋白B淋巴细胞瘤因子2(Bc12)、Bcl2相关X蛋白(BAX)和c-caspase,以及氧化应激信号通路Nrf-2在胞质内和细胞核内的表达及下游蛋白血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白水平.结果 AST4对处于氧化应激损伤状态下的SY5Y细胞具有保护作用,能够减少MAD含量,增加GSH和SOD的含量.AST4增加Bc12表达,减少BAX表达,Bc12/BAX的比值与H202模型组相比显著升高,同时抑制c-caspase的表达.AST4促进Nrf-2核转位,增加下游抗氧化蛋白HO-1的表达.结论 AST4可通过激活Nrf-2/HO-1信号通路,促进Nrf-2核转位,增加HO-1的表达,调节氧化/抗氧化平衡,提高机体抗氧化水平,保护细胞免受氧化损伤和减少细胞凋亡.