沙棘多糖对脑胶质瘤大鼠的抑瘤作用及对HMGB1、MGMT及TLR4表达的影响

目的:探讨沙棘多糖(HRP)对脑胶质瘤大鼠的抑瘤作用及对高迁移率族蛋白1(HMGB1)、O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)和Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法:选取60只SD大鼠,脑部接种C6脑胶质瘤细胞,建立脑胶质瘤模型.造模成功后随机分为模型组(15只)、HRP低剂量组(14只)、HRP高剂量组(14只)、替莫唑胺组(14只).接种5 d后,HRP低剂量组、HRP高剂量组分别灌胃沙棘多糖100 mg/kg、200 mg/kg,替莫唑胺组灌胃替莫唑胺20 mg/kg,模型组灌胃等量生理盐水,每日1次,连续10 d.磁共振成像(MRI)检查并记录肿瘤大小,测量肿瘤体积,计算抑瘤率;苏木精-伊红(HE)染色观察脑胶质瘤形态学变化情况;流式细胞仪检测肿瘤组织细胞凋亡和细胞周期;实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测肿瘤组织中HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肿瘤组织HMGB1、MGMT和TLR4蛋白表达.结果:与模型组比较,HRP低剂量组、HRP高剂量组、替莫唑胺组肿瘤体积减小,Sub-G1期、G0/G1期细胞增加,S期、G2/M期细胞减少,凋亡率升高,HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与HRP低剂量组比较,HRP高剂量组、替莫唑胺组肿瘤体积减小,抑瘤率升高,Sub-G1期、G0/G1期细胞增加,S期、G2/M期细胞减少,凋亡率升高,HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与HRP高剂量组比较,替莫唑胺组抑瘤率降低,Sub-G1期、G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡率降低,HMGB1、MGMT和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05).HE染色显示,模型组脑胶质瘤内肿瘤细胞生长活跃,数量丰富,排列密集,核大深染,肿瘤细胞异型性明显,核浆比例高,核分裂现象多见,呈浸润性生长,无明显细胞萎缩坏死现象;HRP低剂量组、HRP高剂量组和替莫唑胺组细胞数量较模型组减少,细胞生长密度降低,细胞体积减小,出现部分坏死.结论:HRP对脑胶质瘤大鼠具有抑瘤作用,可能与抑制HMGB1、MGMT及TLR4的mRNA转录与蛋白表达有关.