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用蛋白质印迹聚合物研究蛋白质间的相互作用

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摘要
以偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,4-乙烯基吡啶(4-VP)和丙烯腈(AN)为单体,通过无规共聚反应及修饰,合成了具有羧基和吡啶双重识别基团侧链的辅助识别聚合物链(assistant recognition polymer chains,ARPCs),将其与在大肠杆菌中克隆表达的pig FKBP23(FK506 binding protein 23)模板蛋白质进行自组装,然后以聚乙烯醇接枝的大孔树脂微球作为固相载体,将该组装体与另一功能单体丙烯酰胺进行交联聚合反应,洗脱模板后得到蛋白质印迹聚合物,用该印迹聚合物作为抗体取代物吸附内质网体(Endoplasmic reticulum,ER)提取物来研究FKBP23与BiP(immunoglobulin binding protein)之间的相互作用。结果表明,在内质网体中FKBP23与BiP特异性结合,并且结合受Ca2+浓度影响,与用免疫共沉淀法得到的结果相一致,为今后研究蛋白质之间的相互作用提供了一种新方法。
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