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NRP1对非小细胞肺癌放射敏感性的影响

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摘要
目的:探讨NRP1与不同种类非小细胞肺癌细胞株放射敏感性的关系,并筛选辐射抗性最强的细胞株,以便进一步研究NRP1在非小细胞肺癌产生辐射抗性中的作用机制。方法:通过Western blot 技术检测不同来源的 5 种人非小细胞肺癌细胞株(H358、H460、H1299、A549、SK-MES-1) NRP1的基础表达水平,使用深部X光机对5株细胞进行不同剂量照射,通过MTT实验比较肿瘤细胞的辐射敏感性,初步筛选辐射敏感性最高与最低的 2 种细胞;进一步采用克隆形成实验、划痕实验及流式细胞术分别检测细胞存活分数、迁移能力及凋亡率的变化,分析 2 种细胞克隆形成能力、迁移及凋亡率与细胞放射敏感性的关系,并采用Western blot检测照射后 2 种细胞 NRP1 的表达变化。结果:5 种肿瘤细胞NRP1表达量由高到低依次为:A549> SK-MES-1> H358> H460>H1299;X射线对肿瘤细胞的抑制能力随着照射剂量的增加而增强,其抑制率由强到弱依次为:H460> H1299> H358> SK-MES-1> A549,因此选取A549 细胞和 H460 细胞做后续研究。克隆形成实验显示,A549 在 2 Gy照射下的存活分数(SF2)是0.8872,而H460 细胞为0.3134。X 射线对A549 的迁移抑制力弱于 H460,10 Gy X射线作用后 H460 细胞的凋亡率明显高于 A549 细胞,并且受照后 A549 细胞 NRP1 的表达量上调。结论:在非小细胞肺癌细胞中 A549 的辐射敏感性最弱,且辐射抗性的形成可能与NRP1表达上调有关。
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