低频脉冲电磁场通过cAMP/PKA信号通路促进成骨细胞分化的研究

目的 研究50 Hz 0.6 mT低频脉冲电磁场（pulsed electromagnetic fields, PEMFs）是否通过cAMP/PKA信号通路促进成骨细胞分化。方法 体外培养大鼠颅骨成骨细胞（rat calvarial osteoblasts, ROBs），传代融合后采用50 Hz 0.6 mT低频脉冲电磁场处理不同时间后检测细胞内cAMP浓度及PKA磷酸化水平的变化。使用2'，3'-双脱氧腺苷（DDA）抑制细胞内腺苷酸环化酶（AC）活性，检测经低频脉冲电磁场刺激后细胞碱性磷酸酶（ALP）活性及成骨性基因转录的变化；使用KT5720抑制PKA的磷酸化，检测经低频脉冲电磁场刺激后细胞成骨性基因转录及蛋白表达的变化。结果 采用50 Hz 0.6 mT低频脉冲电磁场处理20 min后，ROBs内cAMP浓度显著升高，持续至40 min后迅速下降，至2 h时再次升高，p-PKA亦表现出同样的变化趋势，说明低频脉冲电磁场激活了cAMP/PKA信号通路；使用DDA抑制腺苷酸环化酶活性后，由低频脉冲电磁场引起的ALP活性及成骨性基因转录升高显著下降，同样使用KT5720抑制PKA磷酸化后，由低频脉冲电磁场引起的成骨性基因转录及蛋白表达亦下降，说明cAMP/PKA信号通路参与低频脉冲电磁场促进ROBs分化的过程。结论 50 Hz 0.6 mT低频脉冲电磁场通过cAMP/PKA信号通路促进ROBs分化。