基于PEG6000富集精液来源外泌体的提取及鉴定

目的 介绍PEG6000富集精液来源外泌体的提取和鉴定方法，为精液外泌体相关研究奠定基础。方法 选自南方医科大学南方医院检验中心6名正常志愿者精液，经8% PEG6000富集并多步离心结合超速离心方法获取提取物，然后采用透射电子显微镜观察其形态，纳米颗粒跟踪分析仪分析其大小，蛋白印迹法检测其蛋白组成成分。结果 提取物呈类圆形、椭圆形囊泡，质膜完整，大小约为30~150 nm，内部含有低电子密度物质，均阳性表达CD63、ALIX、TSG101蛋白，且不含精子细胞内质网Calnexin蛋白。结论 经过对提取物的形态、大小以及其蛋白成分分析证实所提取到的物质为精液来源的外泌体，为后续开展精液外泌体临床及基础研究提供了方法学基础。