细胞培育肉种子细胞永生化诱导研究

Yang Feng, Li Yingying,Wang Shouwei, Liu Wenting,Li Shilei

wf（2022）

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Abstract

目的:构建永生化种子细胞是解决细胞培育肉种子细胞来源高效、可持续的有效手段.方法:基于猪成肌细胞,通过端粒酶逆转录酶进行诱导载体的构建,核转染到细胞后分别通过免疫荧光标记、定量PCR、染色体核型分析等方法进行细胞诱导验证.结果:构建永生化细胞诱导载体序列完整度高、无突变;成功将载体转入细胞高效表达并获得诱导阳性细胞株1个;转染后染色体核型未发生不可控的突变;同时诱导后的细胞端粒酶逆转录酶表达量显著高于对照组;更重要的是诱导阳性细胞传代次数突破"Hayflick"增殖界限,实现了200以上的传代次数.结论:构建了猪成肌细胞永生化诱导载体,鉴定了细胞诱导后的稳定性,该永生化种子细胞将在细胞培育肉生产中具有广泛的应用前景.

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